除了两位水管工兄弟,游戏中的经典角色也在电影中亮相。碧姬公主作为蘑菇王国意志坚定的统治者,在片中对马力欧进行了严酷的作战训练,以帮助后者挖掘自身潜力。喜剧演员杰克·布莱克、塞斯·罗根则为片中的大反派酷霸,以及“搞笑担当”大猩猩咚奇刚配音。值得一提的还有,为游戏中的马力欧和路易吉兄弟配音长达三十余年的查尔斯·马丁内斯,也在片中友情客串。就在美珠把龙凤胎留在昭友里给妈妈带,自己辛苦赚钱之际,才刚刚好不容易开的一家美甲店,却又遭遇合伙人卷款潜逃,让身无分文的她,只好再次回到昭友里。
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